Dnes se staly nezbytným činidlem v biologických laboratořích. Prodej léků, ve kterých jsou monoklonální protilátky zaměřené na léčbu závažných onemocnění (lupénka, rakovina, artritida, skleróza), má obrat více miliard dolarů. Ačkoli v roce 1975, když článek byl vydáván o způsobu získání hybridu, jen nemnoho věřilo v jejich praktické použití.
Co jsou monoklonální protilátky
Oni jsou produkováni imunitními buňkami, pocházet z jednoho předchůdce, patřit ke stejnému klonu. Tento jev je pozorován, když jsou B buňky pěstovány v kultuře. Tyto protilátky mohou být produkovány proti téměř jakémukoliv přirozenému antigenu (například proti cizím proteinům a polysacharidům), které se budou specificky vázat. Poté se používají k detekci této látky nebo k jejímu vyčištění. Monoklony jsou široce používány v biochemii, molekulární biologii a medicíně. Není snadné produkovat protilátky, které přímo ovlivňují jejich cenu.
Získání monoklonálních protilátek
Tento proces začíná imunizací zvířat, obvykle myší. K tomu zadejte specifický antigen, který syntetizuje protilátky proti němu. Slezina se potom odstraní z myši a homogenizuje se, aby se získala suspenze buněk. Obsahuje B-buňky produkující protilátku. Pak se smísí s myelomem (myší plazmatytom), který má kontinuální schopnost syntetizovat svůj vlastní druh v kultuře (nádorové klony).
Díky fúzi se vytvoří hybridy nádorových a normálních buněk (hybridomy), které se kontinuálně pěstují a jsou schopny produkovat směs protilátek dané specificity. Dalším krokem po přijetí hybridu je klonování a selekce. Asi 10 fúzních buněk je umístěno do každé jamky speciální tablety a kultivováno, testováno na produkci specifických imunoglobulinů. Hybridomy z jamek obsahujících požadované identické protilátky (paraproteiny) se znovu klonují a kontrolují. Tak to 1-2 krát.
Výsledkem jsou buňky schopné produkovat vlastní imunoglobuliny pouze s jednou požadovanou jedinečnou specificitou. Další klony mohou být zmrazeny a uloženy. Nebo kultivovat, hromadit, vštípit myši, kde také rostou. Následně jsou imunoglobulinové molekuly získané různými metodami purifikovány z nečistot a jsou použity pro diagnostiku v laboratořích nebo pro terapeutické použití.
Je důležité poznamenat, že buněčný klon získaný pomocí hybridomu je myší imunoglobulin, který při uvolnění do lidského těla způsobí rejekční reakci. Výstup nalezen díky rekombinantní technologii. Vezmeme-li fragment myšího monoklonu, spojíme ho s fragmentem lidského imunoglobulinu. V důsledku toho byly získány hybridomy, které byly označovány jako chimérické, které byly již blíže lidem, ale stále vyvolávaly imunitní reakce organismu, které se lišily od požadovaných reakcí.
Další krok byl proveden díky genetickému inženýrství a je spojen s tvorbou tzv. Humanizovaných protilátek, 90% homologních s lidským imunoglobulinem. Z počátečního hybridomového myšího monoklonu zůstává pouze malá frakce buněčné fúze, která je zodpovědná za specifickou vazbu. Používají se v klinických studiích.
Aplikace
Monoklony úspěšně vytlačily imunní séra. Hybridomas vytvořil úžasné příležitosti v analytice: používají se jako „mikroskop“ s neobvykle vysokým rozlišením. S jejich pomocí je možné detekovat unikátní antigeny charakteristické pro rakovinné buňky specifických tkání, získat pro ně monoklony určité specificity a použít je pro diagnostiku a typizaci novotvarů. Používají se při léčbě psoriázy, roztroušené sklerózy, artritidy, Crohnovy choroby, rakoviny prsu a mnoha dalších.
S lupénkou
Pro léčbu těžké psoriázy jsou předepisovány systémové glukokortikosteroidy (steroidní hormony), které ovlivňují lidské hormony a potlačují lokální imunitu. Monoklonální protilátky u psoriázy působí výhradně na aktivní buňky psoriatického zánětu, aniž by zcela potlačovaly imunitní systém. Terapeutickým účinkem je snížení aktivity zánětu, normalizace dělení kožních buněk a vymizení psoriatických plaků.
Pro revmatoidní artritidu
Monoklonální protilátky u revmatoidní artritidy byly účinné v situacích, kdy jiné látky neměly terapeutický účinek. V dnešních evropských zemích jsou hlavním terapeutickým směrem pro toto onemocnění takové léky. Léčebný kurz je dlouhý, protože léky působí, i když účinně, ale pomalu. Vzhledem k obtížím při diagnostice artritidy by měla být léčba léčena co nejdříve, s prvními příznaky a podezřením.
Pro léčbu rakoviny
U velkého počtu pacientů s onkologií obsahují farmaceutické přípravky obsahující monolony naději na zotavení a návrat do normálního života. Mnoho lidí s velkými zhoubnými nádory těla, množstvím nádorových buněk a špatně předvídatelnými po průběhu léčby pociťovalo zlepšení stavu. Monoklonální protilátky pro léčbu rakoviny mají zjevné výhody:
- Připojují se k maligním buňkám a nejenže je činí viditelnější, ale také oslabují, porušují jejich strukturu. Lidské tělo s nimi bojuje mnohem snadněji.
- Při hledání jejich cíle přispívají k blokování receptorů růstu nádorů.
- Vývoj protilátek se provádí v laboratorních podmínkách, kde se záměrně kombinují s malým množstvím radioaktivních částic. Přenášejí tyto částice tělem, dodávají je přímo do nádoru, kde začínají působit.
Princip léčby
Působení monoklonů je jednoduché: rozpoznávají určité antigeny a váží se na ně. Díky tomu si imunitní systém rychle všimne problému a přijde s ním. Pomáhají lidskému tělu vyrovnat se s antigeny. Další velkou výhodou je, že se dotýkají pouze nemocných buněk bez poškození zdravých.
Přípravky s monoklonálními protilátkami
Ačkoliv hybridy normálních a nádorových buněk tohoto typu byly vynalezeny teprve nedávno, spektrum preparátů, které je obsahují, již působí působivě. Pravidelně se objevují nová léčiva. Takové léky, jako většina léků, mají různé vedlejší účinky. Často, po použití monoklonálních látek, existují stížnosti na projevy alergických reakcí ve formě svědění, vyrážky. Příležitostně je léčba doprovázena nevolností, zvracením nebo střevní poruchou. Podrobněji dále na účinné přípravky.
Stelara
Používá se při léčbě závažných forem psoriázy plaku. Farmaceutický přípravek se skládá z lidských monoklonů, které minimalizují riziko vedlejších účinků. Forma uvolňování - roztok pro podkožní zavedení do láhve nebo do injekční stříkačky. Doporučená dávka je 45 mg denně. Druhá injekce se podává 4 týdny po první injekci, poté se injekce provádějí jednou za 12 týdnů. Terapeutický účinek Stelaru se projeví za 15-20 dnů. Udržovací léčba zajišťuje trvání remise. Po 2 injekcích se kůže očistí o 75%.
Remicade
Jedná se o chimérickou protilátku založenou na myších a lidských monoclonech. Lék snižuje zánět epidermis, reguluje dělení kožních buněk. Forma uvolňující - lyofilizovaný prášek pro přípravu parenterálního roztoku nebo v lahvičkách po 20 ml. Prostředek pro infuzi se podává intravenózně po dobu 2 hodin rychlostí až 2 ml za minutu. Dávkování závisí na závažnosti onemocnění. Opakované injekce se provádějí 2 a 6 týdnů po prvním podání. Pro podporu účinku terapie se opakuje každých 1, 5-2 měsíců.
Humira
Rekombinantní monoklon s peptidovou sekvencí identickou s člověkem. Léčivo je účinné při léčbě komplexních forem psoriázy, těžké aktivní revmatoidní a psoriatické artritidy. Používá se jako subkutánní injekce do břicha nebo předního femorálního povrchu. Uvolňování formy - roztok pro subkutánní injekci. 40 mg injekce se podávají 1 krát za 2 týdny.
Simpony
Složky farmaceutického produktu jsou lidské monoklony. Používá se pro progresivní psoriatickou nebo revmatoidní artritidu, ankylozující spondylitidu. Tento prostředek pomáhá snížit příznaky lupénky nehtů a kůže. Uvolňování formy - roztok pro subkutánní injekce (injekční stříkačka nebo autoinjektor). Simponi musí být podáván subkutánně jednou měsíčně.
Cena
Léky můžete koupit v Moskvě za následující ceny:
|
Drog |
Dávka |
Cena |
|
Stelara |
45 mg (jednorázová dávka) |
158000-224500 r. |
|
Remicade |
100 mg (jednorázová dávka) |
41000-55000 str. |
|
Humira |
40 mg (jednorázová dávka) |
49000-68000 str. |
|
Simpony |
50 mg (jednorázová dávka) |
61000 r. |